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細(xì)胞操作流程復(fù)蘇1.將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到37℃；2.從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入恒溫水浴鍋中復(fù)溫，不斷震蕩凍存管以提高復(fù)溫速率；將融化了的凍存管中的用移液管轉(zhuǎn)入一直裝有5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中，充分混勻后，300g離心5min；3.離心完成后棄去上清，用1ml*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入T-25細(xì)胞培養(yǎng)中，再加*培養(yǎng)基4ml，之后轉(zhuǎn)入CO2培...

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轉(zhuǎn)染（Transfection）是指將DNA或者RNA導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過程。轉(zhuǎn)染的目的是產(chǎn)生重組蛋白，或特異性增強(qiáng)或抑制轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的基因表達(dá)。細(xì)胞轉(zhuǎn)染有哪些類型和方法呢？1）根據(jù)導(dǎo)入的核酸存在于宿主細(xì)胞的時(shí)間長(zhǎng)短，可以分為瞬轉(zhuǎn)和穩(wěn)轉(zhuǎn)。瞬轉(zhuǎn)穩(wěn)轉(zhuǎn)導(dǎo)入的DNA沒有整合到基因組中，而是保留在細(xì)胞核上導(dǎo)入的DNA整合到基因組中導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)不傳遞到子代；遺傳改變只是暫...

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細(xì)胞培養(yǎng)基的構(gòu)成中動(dòng)物血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖起著重要作用。在動(dòng)物血清中牛血清的應(yīng)用又是zui廣泛的，所以想要細(xì)胞在培養(yǎng)過程中長(zhǎng)的好、穩(wěn)定，牛血清的質(zhì)量好壞直接影響生物研究的質(zhì)量和安全性，使用質(zhì)量好的牛血清也是細(xì)胞培養(yǎng)中的重要環(huán)節(jié)。血清是提供生長(zhǎng)激素、營養(yǎng)物，以及低分子營養(yǎng)物；提供結(jié)合蛋白；能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力；是細(xì)胞貼壁、鋪展生長(zhǎng)所需因子的來源；起...

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養(yǎng)細(xì)胞可謂是個(gè)精細(xì)活，從事養(yǎng)細(xì)胞的人都知道養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候一旦不注意，就很容易造成細(xì)胞污染，所以想要養(yǎng)好細(xì)胞除了小心謹(jǐn)慎以外，還要提前做好準(zhǔn)備：細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備1）在帶上手套開始細(xì)胞培養(yǎng)之前,先檢查一下移液管和瓶子的數(shù)量是否充足,以免在開始實(shí)驗(yàn)后再次出入操作臺(tái)，這樣可以降低細(xì)胞污染的風(fēng)險(xiǎn)。2）細(xì)胞培養(yǎng)基也應(yīng)先預(yù)熱,選擇只預(yù)熱部分培養(yǎng)基而非整瓶加熱,不但可以節(jié)約實(shí)...

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在制作原代細(xì)胞免疫熒光時(shí)，容易出現(xiàn)一些問題，造成熒光鑒定失敗，將抗原或抗體標(biāo)記上熒光素，制成熒光抗體檢測(cè)組織或細(xì)胞內(nèi)的相應(yīng)抗原（或抗體）時(shí)，一定要注意抗體的比例高低和濃度。制作免疫熒光常用的方法有：方法一：直接法步驟：將熒光標(biāo)記的特異性抗體（抗原）直接加在抗原（抗體）上，經(jīng)一定的溫度和時(shí)間染色，水洗—干燥—封片—鏡檢優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便、特異性高、非特異性染色少缺...